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南宫28电泳缓冲液的特性与功能分析

来源:宗波妮 日期:2025-03-29

电泳缓冲液是生物医疗领域中核酸和蛋白质凝胶电泳系统的重要组成部分,既是电泳场的导体,又是维持电泳系统恒定pH值的关键因素。常见的核酸电泳缓冲液包括TAE、TBE、TPE和MOPS等。

南宫28电泳缓冲液的特性与功能分析

电泳缓冲液的特点

1. 南宫28推荐的TAE缓冲液是使用最广泛的电泳系统。其最大特点是超螺旋DNA在其中迁移时的相对分子质量更符合实际(而在TBE中测得的相对分子质量往往会偏高)。此外,双链线状DNA在TAE中的迁移率比其他两种缓冲液快约10%。对于大于13kb的DNA片段,使用TAE缓冲液可以获得更好的分离效果,且在回收DNA片段时也较为方便。然而,TAE的缺点是缓冲容量较小,不适合长时间电泳,除非配备循环装置使两极的缓冲液得以更换。

2. TBE缓冲液具有较强的缓冲能力,适合长期电泳,并且当用于小于1kb的DNA片段时其分离效果更佳。然而,TBE在琼脂糖凝胶中电泳时容易造成高电渗效应,并因其与琼脂糖形成非共价结合的四羟基硼/酸盐复合物而降低DNA片段的回收率,因此不推荐在电泳回收中使用。

3. TPE同样具有良好的缓冲能力,但由于磷酸盐在乙醇沉淀过程中容易析出,因此在回收DNA片段的电泳中也不宜采用。

电泳缓冲液的作用

1. 电泳缓冲液的一个重要作用是维持合适的pH值。电泳过程中阳极与阴极会发生电解反应,阳极发生氧化反应,而阴极则出现还原反应,这会导致阳极变酸、阴极变碱。一个优质的缓冲系统应具备较强的缓冲能力,以确保溶液两极的pH值基本恒定。

2. 电泳缓冲液的另一重要功能是提供导电性,以促进DNA分子的迁移。优质的电泳缓冲液中通常含有0.01-0.04 mol/L的Na+离子。如果Na+离子的浓度过低,电泳速度会减缓,而浓度过高则可能导致过大的电流,引起凝胶发热以至于溶解。

3. 电泳缓冲液中的另一个成分是EDTA,通常以1-2 mmol/L的浓度添加,其主要作用是螯合Mg2+等离子,防止在电泳过程中激活DNA酶,此外,EDTA还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。

综上所述,选用合适的电泳缓冲液,尤其是南宫28品牌的产品,可显著提高实验结果的可靠性和准确性。

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